而由第十三圖至第十五圖之結果推知，本發明所揭抹草萃取物對於乳腺癌細胞係有專一性之抑制生長作用，意即對於正常乳腺細胞之生長無明顯抑制作用。 斑馬魚胚胎經不同濃度抹草萃取物處理24 小時後，利用福馬林固定後犧牲，藉由解剖顯微鏡可觀察並記錄血管分支之數量，結果如第十一圖及第十二圖所示。 如第五圖所示，在H&E染色下，第一組裸鼠之的組織切片型態呈現MCF-7 細胞浸潤瀰漫的特性，而第二組及第三組裸鼠之組織則呈現現結節狀，顯示投予本發明所揭抹草萃取物或是藥物tamoxifen都會使癌細胞惡性度降低而不會擴散增生。 值得注意的是，乳頭若出現血色、淺黃色異常分泌物，並不代表就是罹乳癌，有可能是良性的乳管內乳突瘤。
- 第十九圖B係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞，其內cyclin D1/cdk4之表現。
- 如請求項4之裝置，其中第一定位構件係藉由第一鉸鏈連接至第二定位構件，且該第二定位構件係藉由第二鉸鏈連接至該玻片固持器，該等第一及第二鉸鏈係分別經組態以使該玻片固持器可自該圓柱體旋離，而利於使用該圓柱體。
- 因為玻片固持器33及玻片56之大部份重量離第一鉸鏈18最遠且插銷38離第一鉸鏈18較近，所以重力將使離第一鉸鏈18最遠之玻片固持器33之一側落下並使玻片固持器33之另一側升起。
- 依據申請專利範圍第1或2項所述用途，其中，該抹草萃取物係能夠抑制下列至少一蛋白表現：cyclinD1、cyclinE、E2F、cdk2、cdk4、p-Rb/Rb、Bcl-2。
- 如請求項1之裝置，其中該過濾器固持器組件包含中心軸及圍繞該中心軸放置且可滑動連接至該中心軸的往復式圓柱體，該中心軸具有相對於該手柄之延伸部份之近端及遠端，該中心軸包含位於該近端之軸肩及位於該遠端之海綿容器，該海綿容器具有遠離該延伸部份之開口。
2.一些跟乳房無關的情形：例如某些精神科用藥、抗憂鬱藥物、止吐藥或嗎啡類(美沙冬)的藥物、避孕藥、甲狀腺功能低下、性交時過度刺激乳頭，甚至精神壓力大等，都可能會引起淡白色乳汁狀的分泌物。 乳頭分泌物 1.乳房纖維囊腫：變化會有黃、棕、綠及灰色透明分泌物，乳暈後的主要乳管退化後鬆弛擴張，會蓄積一些油脂及細胞的廢棄物，乳暈會有像起司膏狀的東西。 假使分泌物的顏色為血色、太過透明、咖啡色、或黃綠色，通常是警訊！ 假使配合上量多，還僅在單邊、甚至單孔出現，最好要趕快就醫檢查。 剛停餵母乳沒多久（兩至三年以內）的女性也還會存有一些乳房分泌物，若量太多、或容易造成乳房痛或發炎，就要就醫檢查。
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第十九圖A係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞，其內Rb/E2F 複合體之表現。 第十九圖B係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞，其內cyclin D1/cdk4之表現。 第十九圖C係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞，其內cyclin E/cdk2之表現。 第二十圖A係以annexin V-PE 乳頭分泌物 apoptosis assay 分析經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞之早期細胞凋亡表現。 第二十一圖A係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞內促凋亡關鍵分子cleaved-casepase 3 及其下游CAD之表現及表現量。 第二十一圖B係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞內Bax、Bcl-2之表現及表現量。
如請求項21之裝置，其中該玻片固持器組件係經組態以使固定於該玻片固持器內之玻片與固定於該圓柱體上之過濾器薄膜依斜角進行初始接觸。 如請求項22之裝置，該過濾器固持器組件另外包含置於 該海綿容器內之海綿，其中該海綿係大於該容器且部份延伸至該開口外。 如請求項4之裝置，其中該玻片固持器組件係經組態以使固定於該玻片固持器內之玻片與固定於該圓柱體上之過濾器薄膜依斜角進行初始接觸。 如請求項4之裝置，其中第一定位構件係藉由第一鉸鏈連接至第二定位構件，且該第二定位構件係藉由第二鉸鏈連接至該玻片固持器，該等第一及第二鉸鏈係分別經組態以使該玻片固持器可自該圓柱體旋離，而利於使用該圓柱體。
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用於製備細胞樣本的裝置 本發明係關於細胞樣本的製法，且更特定而言係關於自患者樣本製備細胞樣本及維持該患者樣本與該樣本之間的一對一相互關係的人工方法及裝置。 由第十九圖A至第十九圖D可知，隨著抹草萃取物濃度上升至250μg/mL，可促使MCF-7 細胞中Rb/E2F 複合體 表現量增加24%、cyclin D1/cdk4 以及cyclin E/cdk2 之結合表現則分別下降26%以及32%。 由第十一圖及第十二圖之結果可知，與濃度為0 g/mL之抹草萃取物相比，血管分支數目隨著抹草萃取物濃度之增加而減少。 具體來說，相較於濃度為0 g/mL之抹草萃取物，當抹草萃取物濃度為100 g/mL，血管新生數量下降43%，而當抹草萃取物濃度為200 g/mL，血管新生數量下降50％以上，而能夠有效抑制血管新生。 由第一圖之結果顯示投予本發明所揭抹草萃取物係能夠不影響個體成長發育，維持體重之增加及營養吸收之能力。
第十八圖B係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞，其內細胞週期蛋白依賴性激酶之表現及表現量。 乳頭分泌物 第十八圖C係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞，其內細胞週期中週期素之表現及表現量。 第十八圖D係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞，其內細胞週期蛋白依賴性激酶抑制者之表現及表現量。 第十八圖E係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞，其內E2F、p-Rb、Rb之表現及表現量。
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另外，乳頭若是有白色乳汁時，可能是泌乳激素過高或懷孕所因素造成，若分泌物是草綠色，大多和乳腺管過於擴張有關，也非一定是得了乳癌，唯有透過乳房攝影及超音波乳房檢查，才是王道。 婦女乳房篩檢門診中，常碰到因乳頭有分泌物而就醫的女性，醫師指出，造成乳頭出現分泌物原因很多，若是有乳頭流血，就要小心可能是乳癌前兆。 因此，提醒婦女自我篩檢乳癌，不只要自摸，還要「察顏觀色」，早期預防治療，降低乳癌發生風險。 之後，當使薄膜28自玻片56之表面撤回時，藉由逆轉翼片34上之壓力，發生逆轉步驟。
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在步驟110中，通過薄膜28對該流體施加真空，以在該薄膜28上收集單層受關注顆粒。 可藉由經程式化以使用已知法則自動收集該單層之微處理器來控制步驟110。 在步驟112中，自該樣品小瓶移出過濾器30之薄膜28，然後再封蓋。 在一該實施例中，過濾器固持器組件較佳在與該把手部份自該延伸部份延伸之方向大約相同的方向上自該手柄之延伸部份延伸。 在一該實施例中，該過濾器固持器組件之中心軸具有相對於該延伸部份之近端及遠端，且包括在近端處之軸肩及在遠端處之海綿容器。 乳頭分泌物 該過濾器固持器組件亦包括在該軸肩與圓柱體之間且圍繞該中心軸放置的彈簧，其中該彈簧在該圓柱體移向該軸肩時產生往復反向力。
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第十二圖係為統計分析經不同濃度之抹草萃取物處理的斑馬魚之血管分支數量的結果。 第十三圖係為MCF-7細胞以不同濃度之抹草萃取物進行培養後之結果。 第十四圖係為H184B5F5/ M10細胞以不同濃度之抹草萃取物進行培養後之結果。 第十五圖係顯示MCF-7細胞及H184B5F5/ M10細胞分別以不同濃度之抹草萃取物培養後之細胞存活率。 第十六圖A係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞，以流式細胞儀分析各個細胞週期之結果。
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此施加至翼片34之額外壓力亦使玻片固持器33自第一位置旋轉至第二位置，由此使薄膜28滾動通過玻片56，以實現玻片56與薄膜28之間的完全接觸。 施加至翼片34之其他額外壓力亦壓縮海綿54，以使薄膜28凸起並有利於受關注顆粒自薄膜28轉移至玻片56。 在步驟118中，自薄膜28移出玻片56，固定，並進行其他加工(如染色)。 在使用時，於圖6之步驟102中，將玻片56裝載至玻片固持器33內，且藉由閂鎖58將第二定位構件32鎖定於第一位置。 在步驟106中，視需要攪動樣品小瓶，以使懸浮於其中所包含之液體內的受關注顆粒分散。 在步驟108中，打開樣品小瓶之瓶蓋，且用手將過濾器30之薄膜28浸入流體中。
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該過濾器固持器組件亦包含置於該海綿容器內之海綿，其係大於該容器且部份延伸至該開口外。 請參第十八圖D，可知抹草萃取物於濃度250μg/mL 時，細胞中cdk2 以及cdk4蛋白表現量分別明顯下降35%以及70%。 由第十八圖E之結果可知，經抹草萃取物處理之細胞中，細胞週期轉錄因子E2F表現量及其調控蛋白p-Rb/Rb 比值皆下降，顯示Rb被去活化（p-Rb）之比率下降，大部分之Rb可能與E2F 形成複合體，使游離之E2F 處於低表現狀態，無法促進細胞週期進行。 乳頭分泌物 由第九圖之結果可知，相較於第一組或第三組來說，投予本發明所揭抹草萃取物之第二組裸鼠腫瘤組織內之Bax/Bcl-2、caspase3 及CAD 乳頭分泌物2025 蛋白表現量皆明顯上升，分別較第一組增加約29％、19％及42％，顯示本發明所揭抹草萃取物能夠促進腫瘤細胞凋亡。
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抹草萃取物用於治療乳癌之用途 本發明係有關於一種植物萃取物之用途，特別係指一種抹草萃取物用於治療乳癌之用途。 但不見得乳癌就一定是紅色狀血性分泌物，也有可能是黃色的漿液性分泌物，透明膠水狀分泌物，若有合併乳房腫瘤時，須高度懷疑乳癌的可能，尤其發生在年紀大者更要格外小心。. 性行為時的強力擠壓或激烈運動造成的乳房晃動都會刺激分泌物出現。
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而由第一圖之結果可知，第二組裸鼠體重逐漸增加，於第14天時，其體重較第0天增加3g，且持續餵食投予抹草萃取物至第28天時，體重已增加7g；第三組裸鼠之體重卻隨著投予時間越長而下降。 本發明之另一目的係在於揭露一種抹草萃取物之用途，其係具有抑制乳癌增生，且對於生物體不會產生嚴重副作用，而能被應用作為醫藥組合物或是輔療品之有效成份。 乳頭分泌物2025 但你若是不放心，且經過一兩個月經週期狀況都沒改善，就要考慮就醫檢查。 藉由在薄膜28與玻片56之間所實現的緊密完全接觸，可使用(例如)使該薄膜輕微凸起成凸面組態之過濾器30之最小正加壓，容易地轉移其等之間所捕集之受關注顆粒。
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量多、白色的雙側乳房分泌物可能起因於泌乳激素過高、腦下垂體腫瘤、服用荷爾蒙、胃藥、身心科藥物、或甲狀腺機能低下等問題。 醫師檢查後可能會抽血檢查泌乳激素，找出乳房分泌物的原因加以治療（包括停止使用部分藥物、或用藥治療荷爾蒙不平衡問題）。 如請求項18之裝置，其中該過濾器固持器組件在與該把手部份自該延伸部份延伸之方向大約相同的方向上自該手柄之延伸部份延伸。 如請求項13之裝置，其中該過濾器固持器組件在與該把手部份自該延伸部份延伸之方向大約相同的方向上自該手柄之延伸部份延伸。
將該第一定位構件22之第二末端26放置在與固定於過濾器固持器組件14內之過濾器30之薄膜28近似相同之高度。 該玻片固持器組件亦包含第二定位構件32，其上形成第一及第二鉸鏈18、20。 第一鉸鏈18將第一定位構件22之第二末端26樞軸附接至第二定位構件32。 乳頭分泌物 如請求項20之裝置，其中該過濾器固持器組件包含中心軸及圍繞該中心軸放置且可滑動連接至該中心軸的往復式圓柱體，該中心軸具有相對於該手柄之延伸部份之近端及遠端，該中心軸包含位於該近端之軸肩及位於該遠端之海綿容器，該海綿容器具有遠離該延伸部份之開口。
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該圓柱體44、凸緣66、及O形環46以摩擦或壓縮配合方式將過濾器30固定於過濾器固持器組件14上。 乳頭分泌物2025 如圖4中所示，在第二定位構件32內形成四個槽孔36，其中在該第二定位構件32之兩側各形成兩個。 玻片固持器33在與該第二定位構件32內之四個槽孔36之位置相對應的位置上具有四個插銷38。 乳頭分泌物 該等插銷38係插入槽孔36中，以使玻片固持器33樞軸附接至第二定位構件32。
根據衛生福利部資料顯示，乳癌發生率在臺灣逐年上升，為女性癌症死亡的第二大原因，且為西方國家女性普遍的疾病之一。 乳癌通常發生在乳房腺上皮組織，當乳腺細胞發生病變並變成腫瘤時，即屬於乳腺癌，而乳癌的特徵包括乳房腫塊或形狀改變、乳頭分泌物、皮膚凹陷、皮膚出現紅色鱗屑狀斑塊等。 基於乳房含有豐富的血管、淋巴，所以乳癌容易擴散到其他器官，造成癌症快速惡化，因此，早期發現乳癌之病徵對於乳癌之治療及預後是非常重要的。 可以不同尺寸、組態、及材料製造樣本玻片製備裝置10之所揭示組件。 此外，裝置10可用於自不同樣品(如婦產科細胞樣品，源自細針抽吸物、取自呼吸道及胃腸道之黏液樣本、諸如漿液性滲出液及尿液及腦脊髓液之體液、來自口腔、乳頭分泌物、皮膚損傷、及眼刷之表面刷取物及刮擦物、及其他來源之細胞)製備樣本。 使用上述專利案中所述之過濾器轉移裝置及方法，在薄膜28上收集顆粒。
如熟習此項技術者所知，雖然通常使用顯微鏡載玻片來製備細胞樣本，但是其他分析元件(如天然或合成材料分析條 等)亦適用於分析及測試，且可用於經適宜玻片固持器組件16改良之裝置10中。 如圖3所示，當第二定位構件32圍繞第一鉸鏈旋轉至第三位置時，玻片固持器33圍繞第二鉸鏈20旋轉，以使玻片56以滾動形式緩慢地與薄膜28完全接觸。 此滾動接觸自薄膜表面輕輕地移除任何過量液體，且實質上防止薄膜28與玻片56之間產生氣泡捕集而不干擾所關注之顆粒的空間分佈。
如請求項4之裝置，其中該圓柱體具有相對於該手柄之延伸部份之近端及遠端，且其中該圓柱體包含位於該近端之凸緣，該凸緣係經組態以使過濾器在該凸緣與該海綿容器之間固定於其上，從而使該過濾器之薄膜置於該海綿容器之遠端。 如圖2中所示，在將過濾器30(將所關注之顆粒收集在其薄膜28上)置於過濾器固持器組件14上之後，使第二定位構件32圍繞第一鉸鏈18旋轉至第二位置，以使玻片56到達接近薄膜28之位置。 因為玻片固持器33及玻片56之大部份重量離第一鉸鏈18最遠且插銷38離第一鉸鏈18較近，所以重力將使離第一鉸鏈18最遠之玻片固持器33之一側落下並使玻片固持器33之另一側升起。 因為樞軸銷38a比頂舉銷 38b更靠近第一鉸鏈18，所以其等比頂舉銷38b上升更多，從而將玻片56依稍偏離水平面之斜角方向置於薄膜28之外緣40下以用於初始接觸。 過濾器固持器組件14在與該玻片固持器組件相隔之位置附接至手柄12之延伸部份62。
於本發明之另一實施例中，本發明係揭露一種將抹草萃取物用於製備抑制乳癌復發之組合物之用途。 藉由投予含有一有效劑量之抹草萃取物之組合物至一已接受乳癌治療之患者，係能夠有效抑制乳癌細胞生長，達到提高乳癌預後及降低復發率之功效。 緣是，為能達成上述目的，本發明係揭露一種將抹草萃取物用於製備治療乳癌之組合物之用途。 藉由投予含有一有效劑量之抹草萃取物之組合物至一乳癌患者，係能夠有效抑制乳癌細胞生長，達到治療乳癌或延緩乳癌惡化之功效。 本發明之主要目的係在於揭露一種抹草萃取物之用途，其係具有抑制乳癌細胞生長之能力，以達到治療乳癌及延緩乳癌惡化之功效，並且能夠作為臨床治療乳癌之輔助療法，以達到提高乳癌預後及降低復發率之功效。。 本發明係提供一種將抹草萃取物用於製備治療乳癌之組合物之用途。
以不同濃度之抹草萃取物：0、100、250μg/mL處理MCF-7 細胞反應0、24和48 小時後，進一步以流式細胞儀分析抹草萃取物在不同時間點之細胞週期性變化，結果如第十七圖所示。 將受精16小時後的斑馬魚卵用Pronase 酵素液（2 mg/mL 溶於一次水）進行破殼，置於37℃溫箱反應4至8分鐘（每兩分鐘觀察一次），以一次水終止反應，製造水流使卵殼浮起並吸除，放回28℃培養箱24 小時後，隨機分為5 組。 分別加入不同濃度之本發明所揭抹草萃取物做處理，濃度分別為0、100、200、500、1000 μg/mL，放置於28℃恆溫培養箱中生長24小時後，再進行後續分析。 更進一步來說，由第一圖至第三圖之結果可知，本發明所揭抹草萃取物不僅能夠抑制腫瘤生長，更能夠維持個體成長發育。